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名稱：HEPES 細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)hepes

分子式：C8H18N2O4S 分子量：238.30
CAS＃：7365-45-9
外觀：白色晶性粉末
特性：

純度：>99% pKa(25℃)：7.5
有效pH范圍：6.8-8.2
儲存條件：室溫

用途：對細(xì)胞無毒性作用。它是一種氫離子緩沖劑，能較長時間控制恒定的pH范圍。使用終濃度為10-50mmol/L，一般培養(yǎng)液內(nèi)含20mmol/LHEPES即可達(dá)到緩沖能力。

細(xì)胞培養(yǎng)常用10mmol/L。

10mmol/L 緩沖液配制方法如下：準(zhǔn)確稱取Hepes 2.383g，加入新鮮三蒸水定容1L。過濾除菌，分裝后4℃保存。如果用于加入細(xì)胞培養(yǎng)液中作緩沖劑，建議培養(yǎng)液避光保存，因為有研究報道培養(yǎng)液中的HEPES在可見光下暴露3h以上將產(chǎn)生對細(xì)胞有毒性的過氧化氫.

HEPES緩沖液是細(xì)胞培養(yǎng)實驗中經(jīng)常用到的緩沖液。在開放式的培養(yǎng)條件中，加入HEPES緩沖液，可防止培養(yǎng)基內(nèi)pH氧化升高，從而將PH維持在7.0左右。那么，HEPES緩沖液的配制步驟和方法是怎樣的，下面就給大家詳細(xì)介紹。

HEPES分子量為238.31，分子式: C8H18N2O4S。

HEPES常用于生物緩沖劑，pH值緩沖范圍：6.8-8.2，用在生化診斷試劑盒、DNA/rna提取試劑盒及PCR診斷試劑盒里。對細(xì)胞無毒性作用。它是一種氫離子緩沖劑，能較長時間控制恒定的pH范圍。使用終濃度為10-50mmol/L。

關(guān)于HEPES 緩沖溶液的配制，不同的文獻(xiàn)資料有不同的說法。根據(jù)用途，一種是單純的HEPES+NaOH，另一種是HEPES+鹽。各種配制方法總結(jié)如下：

一、500ml 1 M HEPES, pH = 7.0 Stock solution的配制

119.15 g HEPES 溶解在400ml蒸餾水中，加0.5~1M 的NaOH水溶液調(diào)節(jié)少所需pH(HEPES的有效pH 范圍是6.8~8.2)，然后用蒸餾水定容500ml，于4攝氏度保存。

二、加少量鹽的HEPES Buffer配方(500ml)

HEPES 6.5g、NaCl 8.0g、Na2HPO4.7H2O 0.198g、用0.5M NaOH 水溶液調(diào)節(jié)pH值，后定容。

三、2×HEPES緩沖鹽溶液的配制

將1.6g NaCl、0.074g KCl、0.027g Na2HPO4.2H2O、0.2g葡聚糖(glucan or dextran)和1g HEPES溶解在90ml的蒸餾水，用0.5M NaOH調(diào)節(jié)所需pH值，再用蒸餾水定容100ml即可。

HEPES 細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)hepes

參考文獻(xiàn)：

《miR‐377‐5p inhibits lung cancer cell proliferation, invasion, and cell cycle progression by targeting AKT1 signaling》 作者:Han Wu, HaiYan Liu, WenJie Liu, YongLi Shi, Dawei Bao 期刊:Journal of Cellular Biochemistry 影響因子:3.448 PMID:30485528

《Loading icariin on titanium surfaces by phase-transited lysozyme priming and layer-by-layer self-assembly of hyaluronic acid/chitosan to improve surface osteogenesis ability》 作者:Yunjia Song,Aobo Ma,Jia Ning,Xue Zhong,Qian Zhang,Xu Zhang,Guang Hong,Ying Li,and Changyi Li 期刊:International journal of nanomedicine 影響因子:4.37 PMID:30425487