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尿素氮檢測(cè)試劑盒

尿素氮（BUN）試劑盒說明書
分光光度法
?尿素氮檢測(cè)試劑盒
產(chǎn)地：北京市通州區(qū)馬駒橋聯(lián)東U谷8三樓
英文名稱：Urea nitrogen content test kit
產(chǎn)品商標(biāo)：solarbio
貨號(hào)：BC1530
規(guī)格：50T/48S
保存與運(yùn)輸：4℃保存或-20℃保存；            
參考價(jià)格：180
庫存狀態(tài)：現(xiàn)貨
關(guān)鍵詞：尿素氮檢測(cè)|尿素氮測(cè)定|尿素氮|BUN|BUN檢測(cè)
產(chǎn)品內(nèi)容：
標(biāo)準(zhǔn)品：液體1mL×1 支，4℃保存。
試劑一：粉劑×1 瓶，4℃避光保存，臨用前加10mL 蒸餾水充分溶解。
試劑二：液體20mL×1 瓶，4℃避光保存。
試劑三：液體 20mL×1 瓶，4℃避光保存。

產(chǎn)品說明：
尿素是生物體內(nèi)含氮化合物分解的終產(chǎn)物，在尿酶催化下分解轉(zhuǎn)化成氨。血液尿素氮是腎功能的主要指標(biāo)之一。在堿性條件下，尿酶水解尿素產(chǎn)生氨，氨與次氯酸反應(yīng)生成氯胺，再與酚衍生物作用生成綠色吲哚酚，在630nm 處有特征吸收峰。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器：
天平、研缽、常溫離心機(jī)、可見分光光度、1ml玻璃比色皿、恒溫水浴鍋。

操作步驟：
一、樣品處理
1. 組織：按照質(zhì)量（g）：蒸餾水體積(mL)為 1：5-10 的比例（建議稱取約0.1g，加入1mL蒸餾水），勻漿后于25℃，12000rpm 離心10min，取上清待測(cè)。
2. 細(xì)胞：按照細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：蒸餾水體積（mL）為500-1000：1 的比例（建議500萬個(gè)細(xì)胞加入1mL 蒸餾水），冰浴超聲波破碎細(xì)胞（功率300w，超聲3 s，間隔7 s，總時(shí)間3min）；然后4℃，10000g 離心10min，取上清置于冰上待測(cè)。
3. 血清或其它液體：直接檢測(cè)。

二、測(cè)定操作

空白管      標(biāo)準(zhǔn)管       測(cè)定管
樣品（μL）              -            -          100
標(biāo)準(zhǔn)品（μL）            -           100          -
H2O（μL）             100           -           -
試劑一（μL）           200          200         200
充分混勻，于 37℃反應(yīng) 10min
試劑二（mL）           350          350         350
試劑三（mL）           350          350         350
充分混勻，于 37℃顯色 10min，于微量石英比色皿，雙蒸水調(diào)零，測(cè)定 630nm 處吸光值，記為 A 空白管、A 標(biāo)準(zhǔn)管和 A 測(cè)定管

三、計(jì)算公式：
1. 按樣本質(zhì)量計(jì)算：
尿素氮含量（mg/g）= （A測(cè)定管- A空白管）/（A標(biāo)準(zhǔn)管- A空白管）×C 標(biāo)準(zhǔn)品÷W= 0.005×（A測(cè)定管- A空白管）/（A標(biāo)準(zhǔn)管- A空白管）÷W
2. 按細(xì)胞數(shù)計(jì)算：
尿素氮含量（mg/104 cell）= （A測(cè)定管- A空白管）/（A標(biāo)準(zhǔn)管- A空白管）×C 標(biāo)準(zhǔn)品÷細(xì)胞數(shù)量= 0.005×（A測(cè)定管- A空白管）/（A標(biāo)準(zhǔn)管- A空白管）÷細(xì)胞數(shù)量
3. 按液體體積計(jì)算：
尿素氮含量（mg/L）=（A測(cè)定管- A空白管）/（A標(biāo)準(zhǔn)管- A空白管）×C 標(biāo)準(zhǔn)品=5×（A測(cè)定管- A空白管）/（A標(biāo)準(zhǔn)管- A空管）

C 標(biāo)準(zhǔn)品：標(biāo)準(zhǔn)品濃度，5mg/L；
W：樣品質(zhì)量，g

注意事項(xiàng)：
1. 配制好的試劑一在2-8℃條件下可保存一周。
2. 低檢出限為80μg/L。

相關(guān)文獻(xiàn)：
《PVT1 knockdown alleviates vancomycin-induced acute kidney injury by targeting miR-124 via inactivation of NF-κB signaling》 作者:Xiaoguang Zhu, Jun Shi, Huicong li and Fang Chen 期刊:RSC advances 影響因子:3.049 PMID:30184744